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摘要
目的探讨视蛋白在人皮肤微血管内皮细胞中的表达,及其对皮肤微血管内皮细胞的增殖、迁移及小管形成的影响。方法通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别验证视蛋白的基因表达水平和蛋白表达水平。然后使用小干扰RNA技术沉默视蛋白3,分别用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法验证视蛋白3的沉默效率。小干扰RNA成功沉默视蛋白3后,通过CCK-8法检测细胞的增殖活力,Transwell检测细胞的迁移能力,小管形成实验评估血管形成能力的情况。最后通过蛋白印迹法检测信号通路相关蛋白的表达情况。结果视蛋白1～5均在血管内皮细胞中表达,其中视蛋白3基因表达水平较其他视蛋白表达高,差异有统计学意义（P<0.05）;沉默人皮肤微血管内皮细胞中视蛋白3后,细胞的增殖、迁移、小管形成能力均减弱,差异有统计学意义（P<0.05）,血管生成的关键蛋白血管内皮生长因子受体2、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B、细胞外调节蛋白激酶1/2、内皮型一氧化氮合酶的表达均降低。结论视蛋白3在人皮肤微血管内皮细胞中高表达,并调控血管形成,可能成为血管生成相关疾病的一个潜在治疗靶点。
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