HBD的N端融合蛋白的跨膜转导作用

作者：杜璇; 顾红艳; 李亚丹; 吴珍; 赵健

来源：华东理工大学学报, 2014, 40(02): 176-181.

DOI：10.14135/j.cnki.1006-3080.2014.02.003

• 穿膜肽
• 肝素结合域
• HeLa细胞
• EGFP的N端

研究人源性穿膜肽HBD的N端融合蛋白的跨膜转导作用。通过DNA重组技术将HBD融合在EGFP蛋白的氨基端(N端),构建重组质粒pET28b-HBD-EGFP-Histag,经IPTG诱导表达和Ni 2+-NTA纯化,获得重组蛋白HBD-EGFP。通过激光共聚焦显微镜定性观察及流式细胞仪定量检测发现,融合在EGFP氨基端的HBD跨膜转导效率比融合在EGFP羧基端(C端)的HBD转导效率提高了约10倍。实验结果表明,N端融合的HBD-EGFP对于外源蛋白具有跨膜运输效果,且比C端融合的HBD具有更高的跨膜转导效率。该结果可为HBD在抗癌药物递送方面的有效应用提供理论依据。

• 单位
  华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室