摘要
目的 通过构建牙本质-牙髓损伤小鼠模型,探讨Wnt/β-catenin信号在其修复中的作用。方法 选择雌性昆明小鼠40只,鼠龄6~8周,体质量18~22 g。将其随机分为Control组、Model组、Li Cl组和DKK1组,每组10只。Control组常规饲养至实验结束,Model组、LiCl组和DKK1组均建立牙本质-牙髓损伤模型并通过牙周膜分别注射0.9%氯化钠溶液(生理盐水)、LiCl(激活Wnt/β-catenin信号通路)和DKK1(抑制Wnt/β-catenin信号通路)干预。损伤后7 d处死小鼠,通过苏木精-伊红(HE)染色,从形态学上观察牙损伤后的情况;Western blot和实时定量聚合酶链式反应(PCR)分别检测Wnt10a、胞内-β连锁蛋白(β-catenin)、支架蛋白Axin2及牙本质涎磷蛋白(DSPP)的mRNA和蛋白水平改变。结果实验成功构建了牙本质-牙髓损伤小鼠模型。使用LiCl和DKK1进行干预,HE染色结果显示LiCl组损伤部位得到良好的修复,Model组的牙本质、牙髓损伤修复不明显,DKK1组的损伤部位则几乎未修复。Western blot和实时定量PCR结果显示,Control组与Model组相比,Wnt10a mRNA、β-catenin mRNA、DSPP mRNA和Axin2 mRNA表达水均下降(Control组:1.003±0.096、1.003±0.100、1.014±0.200、1.000±0.033;Model组:1.724±0.172、1.971±0.261、2.090±0.116、1.827±0.066),且β-catenin mRNA和Axin2 mRNA下降显著(P <0.05);Li Cl组与Model相比,Wnt10a mRNA、β-catenin mRNA、DSPP mRNA和Axin2 mRNA表达水平均上升(LiCl组:3.497±0.475、2.463±0.242、3.563±0.181、2.576±0.326),而DKK1组均下降(1.096±0.141、1.220±0.245、1.163±0.272、1.169±0.047),差异均有统计学意义(P <0.05)。与Control组相比,Model组Wnt10a、β-catenin、DSPP和Axin2蛋白表达水平均下降(Model组:0.511±0.030、0.565±0.029、0.461±0.049、0.315±0.049;Control组:0.609±0.036、0.834±0.038、0.663±0.013、0.480±0.174),差异均有统计学意义(P <0.05);与Model组相比,Wnt10a、β-catenin、DSPP和Axin2蛋白表达水平在Li Cl组上升(0.719±0.041、0.740±0.097、0.557±0.016、0.712±0.092),在DKK1组下降(0.418±0.035、0.019±0.010、0.138±0.017、0.453±0.013),差异均有统计学意义(P <0.05)。结论 在牙本质-牙髓损伤中激活Wnt/β-catenin通路可加快牙本质形成,促进牙损伤的修复。
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