VEGF_(121)在哺乳动物细胞中的稳定表达

作者：唐浩; 胡冬煦; 陈勇; 夏昆; 文娟; 卿志荣; 赵天力; 杨进福

来源：中国现代医学杂志, 2004, 14(10): 82-85.

DOI：10.3969/j.issn.1005-8982.2004.10.024

• VEGF
• CHO细胞
• 转基因
• 基因表达 VEGF
• CHO cell
• gene transfect
• gene express

目的探讨pcDNA3.1-VEGF121质粒对哺乳动物细胞的表达和转染。方法将pcDNA3.1-VEGF121质粒用电转的方法导入CHO细胞中,G418筛选细胞克隆;通过RT-PCR,ELISA,Western-blot在转录水平和蛋白质水平上检测VEGF121在转基因CHO细胞中的表达;通过内皮细胞增殖实验和血管通透性实验检测所表达的VEGF121的生物学活性。结果获得有G418抗性的CHO细胞克隆;RT-PCR扩增出一条大小约450bp的特异性泳带,测序结果与VEGF121mRNA一致;ELISA显示细胞培养上清的VEGF浓度约为8～22ng/ml;Western-Blot检测到大小为17...

• 单位
  医学遗传学国家重点实验室; 中南大学湘雅二医院