草鱼TBK1基因荧光定量PCR检测方法的建立

作者：**; 张浪; 周剑光; 甘金华; 张涛; 何力^*

来源：中国渔业质量与标准, 2022, 12(06): 9-14.

• 草鱼
• TBK1基因
• 18S rRNA基因
• 荧光定量PCR
• 双标准曲线

TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)基因在天然抗菌免疫中发挥重要作用，为研究该基因在草鱼(Ctenopharyngodon idella)抗病天然免疫中的表达水平，本研究根据已报道的草鱼TBK1基因(ciTBK1)序列，设计特异性引物2对，基于ciTBK1和18S rRNA双标准曲线建立了荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测方法。结果表明，建立的标准曲线Ct(Cycle thrshold)值与模板浓度的对数呈现良好的线性关系(R2均大于0.99),建立的qRT-PCR检测方法能特异地定量检测ciTBK1基因，检测灵敏度可达50拷贝/μL,且组内及组间变异系数均小于5%。所建立的qRT-PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。[中国渔业质量与标准，2022,12(6):09-14]

• 单位
  中国水产科学研究院长江水产研究所