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摘要
目的 从MC3T3-E1小鼠前成骨细胞中PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin信号通路的角度，揭示锁阳多糖（cynomorium songaricum polysaccharide,CSP）的促成骨分化机制。方法 使用含有不同浓度CSP的成骨诱导液培养MC3T3-E1细胞，在第1、3、5、7天采用MTT法检测细胞活力。随后分为Con组（0μg/m LCSP）、CSP组（100μg/m L CSP）及CSP+BEZ组（100μg/m L CSP及50μmol/L BEZ(PI3K特异性抑制剂)）；干预14 d后采用茜素红染色观察比较MC3T3-E1的成骨分化情况、Real-time PCR定量分析相关成骨分化m RNA，如Runt相关转录因子2(Runx2)、β-连环蛋白（β-catenin）、骨钙素（Osteocalcin）、Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ）的表达水平；并使用Western blot法检测Runx2、CollagenⅠ、Osteocalcin成骨相关蛋白；PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin通路蛋白的表达情况，以及免疫荧光检测β-catenin的核易位情况。结果 与Con组（0μg/m L）相比，CSP干预均可有效促进MC3T3-E1增殖，100μg/m L的效果更加明显。与Con组比较，CSP可有效促进MC3T3-E1细胞茜素红染色的阳性率，以及成骨相关的m RNA、蛋白表达水平（P <0.05），以及PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、GSK3β、p-GSK3β、β-catenin蛋白表达（P <0.05），同时还可促进β-catenin入核；但是这些促进作用均可被BEZ逆转。结论 CSP可能通过激活PI3K/AKT/GSK3β/β-catenin通路，诱导MC3T3-E1细胞成骨分化。
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