直接竞争化学发光酶免疫法检测呋喃妥因代谢物

作者：李亚楠; 王瑞; 李涛; 王云贵; 黄登宇

来源：食品科学, 2016, 37(08): 231-235.

DOI：10.7506/spkx1002-6630-201608042

• 呋喃妥因
• 1-氨基-乙内酰脲
• 直接竞争化学发光酶免疫检测
• 动物组织

建立检测动物组织中呋喃妥因代谢物的直接竞争化学发光酶免疫法。采用棋盘法确定抗体和酶标抗原的最佳稀释度,通过单因素试验优化包被条件、封闭液种类和竞争反应时间,建立直接竞争抑制曲线,并对方法的灵敏度、特异性、准确度和精密度进行方法学评价。结果表明,经优化,最佳反应条件为抗体稀释度1∶4 000,酶标抗原稀释度1∶80,包被条件为37℃2h后4℃过夜,封闭液为1%牛血清白蛋白,竞争反应1h。该方法的线性检测范围为0.03010.595 ng/m L,IC50为0.559 ng/m L;加标回收率为84.9%103.4%,批内变异系数为3.4%7.8%,批间变异系数为4.7%11.8%;除与呋喃妥因原药交叉反应率为36.2%,与其他结构类似物及衍生化试剂交叉反应率均小于0.1%。该方法灵敏、准确,可用于动物组织中呋喃妥因代谢物的快速筛查。

• 单位
  山西大学; 生命科学学院