miR-148a靶向Wnt1通路对结直肠癌细胞侵袭、迁移能力的影响

作者：蒋学军; 杨勇; 庹磊; 吉祖进; 雷新益

来源：山东医药, 2020, 60(26): 24-28.

• 微小RNA-148a
• 结直肠癌
• Wnt1通路
• 细胞迁移
• 细胞侵袭
• N-钙黏蛋白
• 基质金属蛋白酶2

目的观察微小RNA-148a(mi R-148a)对结直肠癌(CRC)细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其作用机制与Wnt1信号通路的关系。方法取人正常结直肠黏膜细胞FHC及人CRC细胞HCT116、SW620,采用q RT-PCR法检测Wnt1 m RNA、mi R-148a表达。取HCT116细胞,分为Control组、mi R-148a mimic组、mi R-148a NC组。转染后48 h,用Transwell法检测HCT116细胞侵袭、迁移情况;通过荧光实时定量PCR(q RT-PCR)法检测各组细胞mi R-148a、Wnt1 m RNA表达; Western blotting法检测各组细胞Wnt1蛋白及通路蛋白相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、侵袭和迁移相关蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达;采用双荧光素酶报告实验验证mi R-148a与Wnt1的靶向关系。结果与FHC细胞相比,HCT116、SW620细胞中Wnt1 m RNA表达升高,mi R-148a表达降低(P均<0.05); HCT116与SW620细胞相比差异无统计学意义(P> 0.05)。与Control组和mi R-148a NC组相比,mi R-148a mimic组Wnt1 m RNA表达水平、细胞侵袭、迁移能力及Wnt1、β-catenin、MMP-2、N-cadherin蛋白均表达降低,mi R-148a表达水平升高(P均<0.05); Control组与mi R-148a NC组相比,上述指标差异均无统计学意义(P均> 0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示,与mi R-148a NC+Wnt1-3’UTR-WT组比较,mi R-148a mimic+Wnt1-3’UTR-WT组荧光素酶活性降低(P <0.05)。结论 mi R-148a能够靶向抑制Wnt1/β-catenin通路激活,降低N-cadherin、MMP-2蛋白表达,从而抑制CRC细胞的侵袭、迁移能力。