摘要
目的探讨IV胶原酶结合自体血构建复合型脑出血性脑水肿大鼠模型,为脑水肿相关研究提供实验依据。方法 180只SD大鼠随机均分6组:A组(IV胶原酶+自体凝固血+自体抗凝血)、B组(自体凝固血)、C组(IV胶原酶)、D组(自体抗凝血)、E组(空白对照)、F组(假手术); A、B、C、D组建模,E组无处理,F组注射生理盐水;Longa /Bederson、肢体对称实验测评神经功能缺损;干湿重法测脑组织含水量、原子吸收光谱法测电解质K+、Na+、Ca2+;透射电镜(TEM)观察胶质细胞超微结构变化;免疫荧光法进行胶质细胞鉴定;FCM和TUNEL测胶质细胞凋亡;CCK-8和EDU测胶质细胞增殖;实时定量PCR和蛋白免疫印迹测定胶质细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和水通道蛋白4(AQP4) mRNA和蛋白表达;划痕实验和侵袭小室(Transwell )测胶质细胞迁移及侵袭能力。结果与其他各组相比较,A组Longa /Bederson评分、脑组织含水量、电解质Na+最高,电解质K+、Ca2+最少;A组胶质细胞凋亡最多(32.27±3.33),增殖最少(5.33±1.14),迁移(85.35±8.11)与侵袭(8.08±1.96)能力最低;A组中MMP-9和AQP4 mRNA(9.31±0.84;15.69±1.77)和蛋白(4.25±0.27;4.34±0.33)最高(P<0.05)。结论 IV胶原酶结合自体血构建的脑出血性脑水肿大鼠模型脑水肿标志物MMP-9和AQP4特异性更强,细胞学的功能性变化更显著。
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