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摘要
目的：探讨参竹心康汤对心肌纤维化的作用及其机制，为参竹心康汤临床应用提供实验依据。方法：采用血清药理学方法，将20只SD大鼠随机分为中药组、空白组，每组10只。中药组大鼠灌胃给予参竹心康汤；空白组大鼠灌胃给予等量生理盐水，1次/d，连续7 d。腹主动脉采血制备大鼠含药血清和空白血清。将HUVEC细胞随机分为对照组、模型组、阳性对照组、参竹心康汤组。对照组不做特殊处理，其他组细胞以10 ng/mL TGF-β1诱导HUVEC细胞制作纤维化细胞模型，分别加入相应药物或血清处理，收集上述各组细胞。采用细胞免疫荧光法检测CD31、α-SMA、FSP1蛋白表达；采用ELISA法检测collagenⅠ含量；采用RT-qPCR法检测miRNA-21 mRNA、PTEN mRNA、PI3K mRNA、Akt mRNA表达；采用Western blotting法检测TIMP-1、MMP-9、PTEN、PI3K、Akt、p Akt蛋白表达。结果：模型组HUVEC细胞CD31荧光强度，PTEN mRNA相对表达量，TIMP-1、PTEN蛋白相对表达量均明显低于对照组（P<0.05）；模型组α-SMA、FSP1荧光强度，细胞培养液上清collagenⅠ含量，miRNA-21 mRNA、PI3K mRNA、Akt mRNA相对表达量，MMP-9、PI3K蛋白相对表达量及p Akt/Ak1值均明显高于对照组（P<0.05）。阳性对照组和参竹心康汤组HUVEC细胞CD31荧光强度，PTEN mRNA相对表达量，TIMP-1、PTEN蛋白相对表达量均明显高于模型组（P<0.05）,α-SMA、FSP1荧光强度，细胞培养液上清collagenⅠ含量，miRNA-21 mRNA、PI3K mRNA、Akt mRNA相对表达量，MMP-9、PI3K蛋白相对表达量及p Akt/Akt值均低于模型组（P<0.05）。参竹心康汤组HUVEC细胞CD31荧光强度，PTEN mRNA相对表达量，TIMP-1、PTEN蛋白相对表达量均明显高于阳性对照组（P<0.05）；参竹心康汤组α-SMA、FSP1荧光强度，细胞培养液上清collagenⅠ含量，PI3K mRNA、Akt mRNA相对表达量，TIMP-9、PI3K、蛋白相对表达量及p Akt/Akt值均明显低于阳性对照组（P<0.05）。参竹心康汤组HUVEC细胞miRNA-21相对表达量与阳性对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：参竹心康汤可以抑制End MT，从而起到抗心肌纤维化作用，其可能机制与该方下调miRNA-21水平，抑制PTEN/PI3K/AKT通路有关。
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单位湖南中医药高等专科学校; 湖南省中医药研究院附属医院
