miR-383-5p与KIF3B的靶向关系及对皮肤鳞状细胞癌增殖、凋亡的调控

作者：林永丽; 李艳; 雷东春; 杨灿

来源：郑州大学学报(医学版), 2020, 55(02): 253-257.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2019.12.115

• miR-383-5p
• KIF3B
• 皮肤鳞状细胞癌
• 增殖
• 凋亡

目的:探讨miR-383-5p与驱动蛋白家族成员3B(KIF3B)的靶向关系及对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:采用qRT-PCR与Western blot法分别检测人正常皮肤细胞株HaCaT,皮肤鳞状细胞癌细胞株SCC13、A431、HSC-5中miR-383-5p、KIF3B的表达。采用双荧光素酶报告实验验证SCC13中miR-383-5p与KIF3B的靶向关系。分别将miR-NC、miR-383-5p mimics、si-KIF3B、miR-383-5p mimics+pcDNA-NC、miR-383-5p mimics+pcDNA-KIF3B转染至SCC13细胞中,MTT法检测细胞增殖率,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率,Western blot法检测Cyclin D1、Cleaved-Caspase-3的表达。结果:皮肤鳞状细胞癌细胞中miR-383-5p表达降低,KIF3B mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实miR-383-5p能够靶向结合KIF3B。与未转染组和miR-NC转染组细胞比较,miR-383-5p转染组细胞增殖率、克隆形成数和Cyclin D1蛋白表达水平降低,细胞凋亡率和Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。与未转染组细胞比较,si-KIF3B转染组细胞增殖率、克隆形成数和Cyclin D1蛋白表达水平降低,细胞凋亡率和Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。与miR-383-5p+pcDNA-NC组相比,miR-383-5p+pcDNA-KIF3B组细胞增殖率和克隆形成数、Cyclin D1蛋白表达水平增加,细胞凋亡率和Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:miR-383-5p可通过靶向干扰KIF3B表达,抑制皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡。

• 单位
  驻马店市中心医院; 河南省人民医院; 郑州市第三人民医院