茯苓酸对人骨肉瘤细胞系MG-63的增殖凋亡、迁移侵袭影响及PERK/CCAAT信号通路调控作用

作者：施擎宇; 黄帆^*; 王冬明

来源：山东医药, 2023, 63(30): 1-5.

• 茯苓酸
• 骨肉瘤
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 细胞侵袭
• 蛋白激酶R样内质网激酶
• CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白

目的 观察茯苓酸（PA）对人骨肉瘤细胞系MG-63增殖、迁移、凋亡和侵袭的影响，并探讨PA对蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）信号通路的调控作用。方法 体外培养MG-63细胞，分为对照组、低浓度PA组（PA-L组）、中浓度PA组（PA-M组）、高浓度PA组（PA-H组）、高浓度PA+蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）抑制剂GSK2606414组（PA-H+GSK2606414组），PA-L组、PA-M组及PA-H组分别用含20、40及80μmol/L PA的培养基培养，PA-H+GSK2606414组用含80μmol/L的PA和5μmol/L的GSK2606414培养基培养，对照组用空白培养基培养。分别于培养24、48、72 h时采用MTT法观察各组细胞增殖情况；培养24 h时采用细胞划痕实验观察各组细胞迁移情况；培养48 h时采用Transwell实验观察各组细胞侵袭情况；培养48 h时采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率；培养48 h时，采用RT-qPCR法检测PERK及CHOP的mRNA表达，并采用WESTERN Blotting法检测PERK/CHOP信号通路相关蛋白及凋亡相关蛋白真核生物起始因子2α(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、CHOP、BCL2相关X蛋白（Bax）及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)。结果 与对照组比较，PA-M组及PA-H组培养48与72 h时细胞OD570nm值低、细胞迁移率低、细胞侵袭数少、细胞凋亡率高（P均<0.05）；与PA-M组相比，PA-H组培养48及72 h时的细胞OD570nm值低、细胞迁移率低、细胞侵袭数少、细胞凋亡率高（P均<0.05）；与PA-H组相比，PA-H+GSK2606414组细胞培养48及72 h时的OD570nm值高、细胞迁移率高、细胞侵袭数多、细胞凋亡率低（P均<0.05）。与对照组比较，PA-M组及PA-H组细胞PERK及CHOP mRNA相对表达量高，PERK及eIF2α磷酸化水平高，ATF4、CHOP、Bax蛋白相对表达量高，Bcl-2相对表达量低（P均<0.05）；与PA-M组相比，PA-H组细胞PERK及CHOP mRNA相对表达量高，PERK及eIF2α磷酸化水平高，ATF4、CHOP、Bax蛋白相对表达量高，Bcl-2相对表达量低（P均<0.05）；与PA-H组相比，PA-H+GSK2606414组细胞PERK及CHOP mRNA相对表达量低，PERK及eIF2α磷酸化水平低，ATF4、CHOP、Bax蛋白相对表达量低，Bcl-2相对表达量高（P均<0.05）。结论 PA可抑制MG-63细胞的增殖、迁移及侵袭，促进细胞凋亡。PA可能通过激活PERK/CHOP信号通路，抑制MG-63细胞的增殖迁移及侵袭，促进MG-63细胞的凋亡。

• 单位
  上海中医药大学附属龙华医院