摘要
根据GenBank中猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)0RF1基因序列,设计合成了一对引物,对PCV2广东株(GD)ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(942 bp)克隆入pMD18-T载体,筛选获得重组质粒,命名为pMD-ORF1。将ORF1的KpnⅠ和XbaⅠ双酶切产物插入原核表达载体pBAD/gⅢC,得到重组子,命名为pBAD/gⅢ-ORF1。测序分析表明克隆的ORF1与德国分离株AF201897核苷酸序列同源性高达99.5%。与其它PCV2核苷酸序列同源性为92.1%-99.9%,推导的氨基酸序列同源性为90.2%-99.5%。同时,测序结果表明所克隆的ORF1准确插入pBAD...
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单位华南农业大学; 广东省农科院