猪Ⅱ型圆环病毒ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：蒋智勇; 宋长绪; 王贵平; 高向阳; 赵亚华

来源：动物医学进展, 2004, (05): 59-62.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2004.05.018

• PCV2ORF1
• 克隆
• 大肠杆菌表达 PCV2 ORF1
• cloning
• expression in E. coli

根据GenBank中猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)0RF1基因序列,设计合成了一对引物,对PCV2广东株(GD)ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(942 bp)克隆入pMD18-T载体,筛选获得重组质粒,命名为pMD-ORF1。将ORF1的KpnⅠ和XbaⅠ双酶切产物插入原核表达载体pBAD／gⅢC,得到重组子,命名为pBAD／gⅢ-ORF1。测序分析表明克隆的ORF1与德国分离株AF201897核苷酸序列同源性高达99.5％。与其它PCV2核苷酸序列同源性为92.1％-99.9％,推导的氨基酸序列同源性为90.2％-99.5％。同时,测序结果表明所克隆的ORF1准确插入pBAD...

• 单位
  华南农业大学; 广东省农科院