尿路上皮癌抗原1基因沉默可抑制人胰腺癌细胞的体外迁移和侵袭

作者：许朝; 诸琦; 余跃; 张开光; 王巧民

来源：肿瘤, 2015, 35(11): 1192-1199.

• 胰腺肿瘤
• 基因沉默
• 肿瘤转移
• 尿路上皮癌抗原1
• 上皮-间质转化

目的 :检测尿路上皮癌抗原1(urothelial cancer associated 1,UCA1)在胰腺癌组织和细胞系中的表达情况,探讨靶向沉默UCA1基因表达对胰腺癌PANC-1细胞体外迁移和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法 :应用实时荧光定量PCR法检测UCA1在胰腺癌组织及其癌旁组织和胰腺癌细胞系(PANC-1、SW1990、Bx PC-3和Capan-2)中的表达水平。分别构建插入针对UCA1基因的特异性sh RNA(UCA1-sh RNA)和阴性对照sh RNA(negative control-sh RNA,NC-sh RNA)的重组表达质粒,并将它们转染至胰腺癌PANC-1细胞中,随后采用实时荧光定量PCR法检测UCA1表达的变化。应用细胞划痕愈合实验和Transwell侵袭实验分别检测沉默UCA1基因表达对PANC-1细胞体外迁移和侵袭能力的影响。蛋白质印迹法检测UCA1基因沉默对上皮-间质转化相关分子钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达的影响。结果 :UCA1在胰腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.000 1),且UCA1在伴有转移的癌组织中表达水平高于无转移者(P=0.002)。4株胰腺癌细胞系中均能检测到UCA1 m RNA表达,其中PANC-1细胞中相对高表达(P<0.01)。UCA1-sh RNA转染PANC-1细胞后,UCA1的表达水平明显降低(P<0.01)。相较于NC-sh RNA转染组,UCA1-sh RNA转染后的PANC-1细胞体外迁移(P<0.05)和侵袭能力(P<0.01)均明显降低。UCA1-sh RNA转染组细胞中vimentin表达水平明显下调(P<0.01),而E-cadherin表达水平则明显上调(P<0.01)。结论 :UCA1在胰腺癌中高表达,通过sh RNA转染靶向沉默该基因表达可明显抑制胰腺癌细胞的体外迁移和侵袭,其机制可能与UCA1调控上皮-间质转化有关。

• 单位
  安徽医科大学; 上海交通大学医学院附属瑞金医院