聚酰胺-胺-聚谷氨酸-聚乙烯亚胺共聚物的制备及作为基因载体的性能研究

作者：陈英; 胡锦芳; 张长林; 曹端文^*; 魏筱华^*

来源：药学学报, 2019, 54(05): 919-926.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2018-1143

• 聚酰胺-胺
• 聚谷氨酸
• 聚乙烯亚胺
• 共聚物
• 基因载体

本文合成了一种以零"代"聚酰胺-胺(generation 0 polyamidoamine, PAMAM G0)为内核、聚谷氨酸接枝小分子聚乙烯亚胺(polyethylenimine, PEI)为侧链的共聚物(PGLP),并研究了其作为基因载体的性能。应用1H NMR(proton nuclear magnetic resonance spectroscopy)确认结构;采用琼脂糖凝胶电泳考察PGLP对基因的压缩包裹能力和保护能力,动态光散射粒度分析仪测定PGLP/pDNA复合物的粒径及电位;运用细胞毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8, CCK-8)和溶血实验(南昌大学第一附属医院科研伦理委员会批准)考察PGLP的细胞毒性,体外细胞转染实验评估PGLP/pDNA复合物的转染能力。结果表明, PGLP可以有效压缩包裹DNA并保护其免受血清酶的降解;当PGLP/pDNA质量比大于或等于1 (w/w≥1)时,复合物平均粒径和电位分别约在105～200 nm和+10～+28 mV之间。毒性实验表明:PGLP及其复合物的细胞毒性均显著低于PEI 25K及其复合物,具有较高的安全性。细胞转染实验表明:PGLP/pDNA复合物在w/w=8时可获得最大转染能力,在有血清和无血清的条件下对多种细胞(HEK 293T、HeLa、BEL 7402和RASMC)的转染效率均显著高于PEI 25K或Lipofectamine 2000在最优转染比的效率。抗血清转染能力分析表明:PGLP/pDNA复合物(w/w=8)在血清中的转染效率与无血清转染效率的比值(转染比)高于PEI 25K/pDNA复合物,具有更强的抗血清转染能力。因此, PGLP是一种有潜力的基因载体。

• 单位
  南昌大学第一附属医院; 南昌大学