大鼠降钙素基因相关肽重组腺病毒的构建与鉴定

作者：黄泰源; 薛涛; 张光武

来源：中华临床医师杂志(电子版), 2012, (15): 4362-4366.

• 降钙素基因相关肽
• 重组腺病毒
• 基因治疗 Calcitonin gene-related peptide
• Recombinant adenovirus
• Gene therapy

目的利用AdMaxTM腺病毒载体系统,构建大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)基因重组腺病毒载体,包装重组腺病毒并鉴定。方法根据Genbank提供的大鼠CGRP序列信息(NM_001033956.1),合成序列全长,PCR方法扩增目的基因,将CGRP/His基因片段亚克隆至穿梭质粒pDC316,形成重组质粒pDC316-CGRP/His,挑选测序正确的质粒与骨架质粒pBHGloxdelE13cre共转染293A细胞,包装出重组腺病毒Ad-CGRP/His,利用PCR和Western鉴定基因的表达。结果 (1)成功构建pDC316-rCGRP/His重组质粒。(2)包装出表达rCGRP/His的重组...

• 单位
  北京大学首钢医院