表达乙肝病毒YVDD变异株肝癌细胞模型的建立

作者：邓欣; 李辉; 蒋小玲; 吴其恺; 聂广; 刘钦

来源：中西医结合肝病杂志, 2006, 16(4): 231-233.

DOI：10.3969/j.issn.1005-0264.2006.04.015

• 乙肝病毒YVDD变异
• 细胞模型
• 基因转染

目的:建立能稳定表达乙肝病毒(HBV)YVDD变异株的细胞模型,为研究HBV YVDD变异株的生物学特性和进行抗病毒药物筛选提供细胞模型.方法:以pcDNA3.1-HBV-YVDD为模板设计两对引物,扩增带不同酶切位点的HBV全基因,扩增产物纯化后,经酶切、连接,得到pcDNA3.1-HBV-YVDD重组体.采用脂质体转染技术,将pcDNA3.1-HBV-YVDD重组体转染体外培养的HepG2细胞.细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg的检测用酶联免疫吸附法(ELISA)法,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HBV多聚酶的表达.结果:建立了HBV-YVDD变异株体外感染的细胞模型HepG2-2HBV-YVDD.该细胞模型能表达较高水平的HBsAg和HBeAg,并能检测到多聚酶的表达.结论:成功构建了能较稳定表达HBV-YVDD变异株的细胞模型.

• 单位
  武汉大学; 深圳市东湖医院