OGG1与Smad7蛋白相互作用的具体区域鉴定

作者：方耀威; 许志亮; 王亚红; 高胜兰; 吴铿; **^*

来源：山西医科大学学报, 2021, 52(07): 852-856.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2021.07.008

• OGG1
• Smad7
• 蛋白截段体
• pull-down检测

目的体外探究8-氧鸟嘌呤DNA糖化酶1(OGG1)蛋白和Smad家族成员7(Smad7)蛋白相互作用的具体区域。方法利用原核表达系统表达OGG1和Smad7的蛋白截段体,通过GST蛋白纯化和pull-down实验验证两个蛋白不同截段体间的相互作用。结果将OGG1与Smad7进行pull-down实验,发现两者存在相互作用。将含有1-346个氨基酸(1-346aa)全长片段的OGG1及其截段体1-242 aa、1-138 aa、1-63 aa和34-346 aa,与Smad7全长(1-428 aa)进行pull-down实验,发现OGG1全长(1-346 aa)及其截段域(34-346 aa)与Smad7具有相互作用。将OGG1截段域(34-346 aa)与Smad7全长(1-428 aa)及其截段体1-308 aa、1-240 aa和1-128 aa进行pull-down实验,发现只有Smad7截段体1-128 aa与OGG1截段体34-346 aa不存在相互作用。结论初步判断OGG1(34-346 aa)和Smad7(128-240 aa)可能为OGG1与Smad7发生相互作用的区域。

• 单位
  广东医科大学附属医院