红花SCoT-PCR反应体系的建立与优化

作者：刘新梅; 梁慧珍^*; 许兰杰; 余永亮; 杨红旗; 谭政委; 董薇; 李磊; 肖爱利

来源：分子植物育种, 2022, 20(03): 895-901.

DOI：10.13271/j.mpb.020.000895

• SCoT
• 体系优化
• 红花(Carthamus tinctorius)

为构建红花最佳扩增体系，为以后研究红花遗传多样性和目的基因标记提供了科学依据。本研究采用L16(45)正交试验和单因素试验相结合的方法对红花SCoT-PCR反应体系中的引物，DNA、dNTPs、PCR Buffer (含Mg2+)、Taq DNA聚合酶进行优化，每个因素都设为四水平。结果表明，五个影响因素中dNTPs的影响最大，红花最佳反应体系为引物0.6 mmol/L,DNA 60 ng,dNTPs 0.25 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U,PCR Buffer (含Mg2+) 2μL,ddH2O补足至20μL。选用引物S15对八种红花资源对扩增体系进行验证，结果显示扩增条带清晰，多态性好，表明该体系适合红花分子标记研究。

• 单位
  郑州大学; 河南省农业科学院; 生命科学学院