摘要
目的观察过氧化氢(H2O2)诱导人黑素A375细胞出现氧化性损伤后,TLRs的表达变化与白癜风病理过程的关系。方法利用不同浓度的过氧化氢处理A375细胞,分为空白对照组(不予H2O2处理)及3个不同浓度(100、500和1000μmol/L) H2O2处理的实验组,分别作用24、48、72h后,通过黑色素含量检测试剂盒检测诱导后细胞的黑色素含量变化,CCK8检测细胞氧化损伤程度,同时通过q PCR检测过氧化氢诱导后A375细胞中TLRs的表达变化。结果 500μmol/L和1000μmol/L的H2O2能显著诱导A375细胞损伤,其中500μmol/L处理72h时细胞活性损伤率约为50%,1000μmol/L过氧化氢处理72h时细胞活性损伤> 50%。黑色素含量检测显示,500μmol/L和1000μmol/L过氧化氢处理后A375细胞中黑色素含量降低最显著。q PCR检测结果显示TLRs家族基因的表达均不同程度上调。结论综合评估过氧化氢诱导后细胞活性和细胞内黑色素含量的变化,确定500μmol/L处理72h为A375细胞氧化应激损伤的最佳诱导条件。初步提示TLRs家族可能在氧化应激诱导的黑色素细胞损伤的过程中发挥重要作用,为开发新的药物靶点提供依据。
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单位广西中医药大学第一附属医院; 广西中医药大学; 广西壮族自治区皮肤病防治研究所