籼稻明恢86多基因遗传转化体系的研究

作者：魏林艳; 连玲; 魏毅东; 罗曦; 何炜; 谢鸿光; 谢华安^*; 张建福^*

来源：福建农业学报, 2019, 34(06): 621-629.

DOI：10.19303/j.issn.1008-0384.2019.06.001

• 基因
• 遗传转化
• 籼稻
• 明恢86

【目的】探索适合籼稻明恢86多基因遗传转化的条件,为创制含高产、抗逆、抗虫、抗病等基因的水稻新材料奠定基础。【方法】以籼稻明恢86为受体材料,将构建好的含作物高产基因RRM2、耐旱基因HS1、抗除草剂基因EPSPS、抗虫基因Bt、细胞凋亡抑制基因iap和促细胞再生基因p35等多基因载体(载体分别命名为P5和P8)进行遗传转化。在此基础上,分别对多基因遗传转化体系的受体材料、农杆菌浓度、侵染时间、共培养方式、G418筛选浓度和草甘膦筛选浓度等主要影响因素进行试验,探讨其适宜的转化条件。【结果】受体材料的筛选结果表明,幼胚的出愈率显著高于成熟胚,且其愈伤组织状态相对较好;各转化条件的筛选结果,农杆菌侵染浓度OD600为0.4～0.6、侵染时间15～20 min、共培养2～3 d、培养基上添加无菌滤纸、G418筛选浓度150 mg·L-1和草甘膦筛选浓度800 mg·L-1是提高转化效率的优化条件; PCR分析结果,多基因载体P5中的GUS基因成功转入籼稻明恢86。【结论】通过对培养条件的优化,可使籼稻明恢86愈伤组织的诱导愈伤率和抗性愈伤率得到显著提高。

• 单位
  农业部; 杂交水稻国家重点实验室; 福建省农业科学院