艰难梭菌A毒素诱导人黏液表皮样癌MEC-1细胞DNA双链损伤研究

作者：尤培蒙; 王丽丽; 杨宇琴; 王晨曦; 赵晋; 郭忠^*

来源：沈阳大学学报(自然科学版), 2021, 33(06): 462-469.

DOI：10.16103/j.cnki.21-1583/n.2021.06.002

• 艰难梭菌A毒素
• 人黏液表皮样癌细胞(MEC-1)
• DNA双链损伤
• γH2AX
• pATM

研究了艰难梭菌A毒素(Clostridium difficile toxin A,TcdA)诱导人黏液表皮样癌细胞(MEC-1)DNA双链损伤的机制。采用MTT法、中性彗星电泳法与免疫荧光法三联实验,分别检测TcdA对MEC-1细胞增殖抑制的影响、TcdA对MEC-1细胞造成DNA双链损伤程度以及TcdA引起MEC-1细胞DNA双链断裂相关蛋白γH2AX、pATM表达的影响。结果表明:TcdA(50～800μmol·L-1)抑制了MEC-1细胞的生长且存在时间和浓度依赖特点;TcdA作用MEC-1细胞24 h、100～400μmol·L-1浓度曲线组和TcdA浓度为800μmol·L-1、作用MEC-1细胞3～24 h时间曲线组,MEC-1彗星细胞的尾长、尾部DNA、尾矩和Olive尾矩呈增加趋势,头部DNA百分比减少,800μmol·L-1TcdA作用MEC-1细胞24 h,上述参数均有统计学意义;100～800μmol·L-1TcdA作用MEC-1细胞24 h浓度曲线组和TcdA浓度为800μmol·L-1、作用MEC-1细胞3～48 h时间曲线组、γH2AX、pATM阳性细胞率基本呈增加趋势。艰难梭菌A毒素杀伤肿瘤细胞的机制是诱导肿瘤细胞的DNA双链断裂损伤,其可能与抑制MEC-1细胞增殖,影响细胞γH2AX、pATM的表达水平有关。

• 单位
  西北民族大学