基质金属蛋白酶-1 shRNA真核表达载体的构建

作者：朱秀丽; 朱晓英; 郭青玉; 王静; 温德升; 吴军正

来源：武警医学, 2012, (02): 111-114.

DOI：10.14010/j.cnki.wjyx.2012.02.030

• 涎腺
• 腺样囊性癌
• 短发夹状RNA
• 真核表达载体
• 基质金属蛋白酶1 salivary gland
• adenoid cystic carcinoma
• short hairpin RNA
• eukaryotic expression vector
• matrix metalloproteinase 1

目的构建基质金属蛋白酶-1(MMP-1)特异的RNA干扰质粒载体。方法根据GenBank数据库提供的MMP-1基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA(Short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体(pWH1-MMP1)稳定转染至人腺样囊性癌ACC-M细胞系后,应用RT-PCR、免疫组织化学及Western Blot对细胞MMP1的表达进行检测。结果在成功转染pWH1-ACC-M表达载体的ACC-M细胞中,MMP1 mRNA和蛋白的表达明显降低。结论成功构建了MMP1特异性shRNA表达载体,可有效...

• 单位
  中国人民武装警察部队总医院; 第四军医大学