BHK-21细胞中猪乙型脑炎病毒动态增殖的研究

作者：张福良; 马圣明; 邢月腾; 刘芳; 曹金泽

来源：黑龙江畜牧兽医, 2023, (05): 75-137.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2022.03.0355

• 猪乙型脑炎病毒
• BHK-21细胞
• 实时荧光定量PCR
• TCID50
• 增殖曲线
• 最佳收毒时间

为了研究猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)在仓鼠肾细胞(BHK-21细胞)中的增殖情况，试验首先建立了实时荧光定量PCR方法，并检测该方法的敏感性、特异性和重复性，然后利用建立的实时荧光定量PCR方法和病毒半数组织感染量(TCID50)方法测定并比较猪JEV在BHK-21细胞中的增殖规律。结果表明：建立的猪JEV实时荧光定量PCR检测方法的扩增效率为99.3%,敏感性、特异性和重复性良好，检测敏感性可以达到1.0×101 copies/μL;TCID50方法测定的细胞悬液和细胞培养上清液中的病毒含量分别为1.0×105.44 TCID50/0.1 mL和1.0×104.86 TCID50/0.1 mL,实时荧光定量方法测定的病毒粒子数量分别为1.0×107.50 copies/μL和1.0×105.60 copies/μL,两种方法在细胞悬液中出现峰值的时间为感染病毒后60小时，在细胞培养上清液中为72小时。说明猪JEV在BHK-21细胞中增殖的最佳收毒时间是感染病毒后60小时。

• 单位
  安阳工学院