目的构建小鼠T-bet基因重组真核表达载体pcDNA3-T-bet,为T-bet基因治疗研究提供有效的生物表达系统.方法采用内切酶切从质粒T-bet/GFP-RV中获得约1.7kb的小鼠T-betcDNA片段,以单酶切非定向克隆方式与真核表达质粒pcDNA3连接,构建真核表达载体pcDNA3-T-bet.结果经PCR筛选阳性重组子,双酶切鉴定T-bet基因重组方向,并测序鉴定无错配及插入移位等