甲型流感病毒核蛋白单克隆抗体制备及其初步应用

作者：张儒轩; 沃恩康; 丁建祖; 方迪; 陈帅帅; 杨新燕; 郭潮潭

来源：国际流行病学传染病学杂志, 2017, 44(02): 79-84.

• 流感病毒A型
• 核蛋白
• 单克隆抗体

目的制备甲型流感病毒核蛋白(NP)单克隆抗体,为甲型流感病毒诊断试剂盒以及相关研究提供材料。方法大肠埃希菌BL21(DE3)表达NP作为免疫原,免疫Balb/c小鼠后取脾脏细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得阳性细胞株,注射小鼠腹腔得到单克隆抗体,纯化后进行Western印迹法、ELISA法、细胞免疫染色和荧光法、双抗夹心ELISA法确定NP抗体的生物学特性,探索应用范围。结果从Western印迹法、ELISA和细胞免疫染色法的结果可得知,抗NP单克隆抗体可以与免疫原特异性结合,也可以与H1N1、H3N2亚型流感病毒的NP特异性结合,具备检测流感病毒的能力。双抗夹心ELISA法进一步提升了抗体对抗原的检测灵敏度至128 pg。同时,通过细胞免疫荧光法观察到抗体可在细胞内显示NP从细胞核扩散到细胞质的过程。结论制备的抗体成功检测H1N1、H3N2两种亚型的流感病毒,可作为用于流感防治的流感病毒诊断试剂盒的材料。

• 单位
  浙江省医学科学院