HSF1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞的永生化

作者：刘梅冬; 张华莉; 龚环宇; 陈广文; 王慷慨; 鄂顺梅; 肖献忠

来源：中南大学学报(医学版), 2006, (02): 174-177.

DOI：10.3321/j.issn:1672-7347.2006.02.004

• HSF1
• 基因敲除
• 胚胎成纤维细胞
• 永生化
• SV40T抗原 heat shock transcription factor 1
• knockout
• embryonic fibroblasts
• immortalization
• SV40 T antigen

目的:建立HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为HSF1的功能研究提供实验模型。方法:用脂质体介导的基因转染法将pSV 3 neo质粒导入HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞,经G 4 1 8筛选,抗性克隆扩大培养,建立永生化细胞系;用PCR检测两种细胞株中目的基因的整合,用RT-PCR法鉴定SV 4 0T基因在转染细胞中的表达;用W estern b lot检测所建细胞株的诱导型热休克蛋白7 0的表达情况。结果:有3个细胞克隆已扩大培养稳定传代达6个月,经鉴定SV 4 0 T抗原已整合到两种细胞中且稳定表达,HSF1-/-胚胎成纤维细胞热...

• 单位
  中南大学湘雅三医院; 中南大学湘雅医学院