棘孢木霉GH11家族木聚糖酶的异源表达及酶学性质

作者：余静; 刘学强; 马俊文; 李雪; 江正强; 闫巧娟; 杨绍青^*

来源：食品科学技术学报, 2020, 38(06): 29-38.

• 木聚糖酶
• GH11家族
• 棘孢木霉
• 异源表达
• 酶学性质

从棘孢木霉(Trichoderma asperellum)中克隆得到一个糖香水解酶(glycoside hydrolase,GH)11家族木聚糖酶基因TaXyn11A,并在大肠杆菌中进行了异源表达。该基因含有一个672 bp的开放阅读框,编码223个氨基酸,编码的蛋白与来自哈茨木霉C4(Trihoderma harzianum)的GH11家族木聚糖酶xynⅡ(NCBI accession No.B5A7N4.1)的同源性为85.2%。粗酶液经Ni-NTA亲和层析一步纯化得到电泳级纯酶(TaXyn11A),该酶分子质量为24.2 kDa。研究了纯酶的酶学性质,结果表明:TaXyn11A为酸性中温木聚糖酶,最适pH值和最适温度分别是5.0和50℃,在pH值为4.0～10.0时和45℃及以下保持稳定,45℃时半衰期为14.3 h。EDTA、Mn2+和Cr3+对该酶有激活作用,而SDS和CTAB对该酶有抑制作用。底物特异性及水解特性分析表明:TaXyn11A可特异性水解燕麦木聚糖、小麦阿拉伯木聚糖、榉木木聚糖和桦木木聚糖等木聚糖底物,比酶活力分别为989.6、727.6、706.0、484.5 U·mg-1,水解12 h后,产物以聚合度为2～6的低聚木糖为主。这些优良的酶学特性使TaXyn11A在低聚木糖生产中具有潜在应用价值。

• 单位
  中国农业大学