敲低Raf激酶抑制蛋白促进LX-2人肝星状细胞增殖

作者：聂金兰; 白法承; 黄权芳; 谭实美; 林兴

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2017, 33(01): 53-61.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008044

• Raf激酶抑制蛋白(RKIP)
• 胞外信号调节激酶(ERK)
• 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)
• 增殖
• 胶原蛋白
• 肝纤维化

目的研究Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在LX-2人肝星状细胞增殖中作用。方法将RKIP小干扰RNA(siRNA-RKIP)重组质粒转染至LX-2细胞,培养5 d,并筛选出稳定转染的细胞。MTT法检测沉默RKIP后LX-2细胞的增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期;实时定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和1型胶原蛋白(Col1)mRNA的表达。Western blot法检测RKIP、α-SMA、Col1及胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路相关蛋白的表达水平。结果与空白对照组相比,RKIP低表达明显诱导LX-2细胞增殖,抑制细胞凋亡,增加G2期细胞比例,提高Col1、α-SMA mRNA和蛋白表达。此外,RKIP的沉默明显提高ERK/MAPK磷酸化水平。结论敲低RKIP的水平促进LX-2细胞的增殖,其机制与激活ERK/MAPK信号通路有关。

• 单位
  广西中医药大学第一附属医院; 广西医科大学