摘要
目的 探讨E3泛素连接酶家族的环指蛋白180(ring finger protein 180,RNF180)基因在胰腺癌中的甲基化情况及其表达调控机制。方法 9个胰腺癌细胞系和112例原发性胰腺癌组织,以及半定量RT-PCR和甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)技术被应用于RNF180基因的甲基化状态和表达调控研究。结果 RNF180在CFPAC1、Panc5.04和PANC1细胞中高表达,MSP结果显示其启动子区域呈非甲基化状态;在T3M4和MIAPaCa2细胞中表达减少,其启动子区呈部分甲基化状态;在SW1990、Panc10.05、PANC3.11和AsPC1细胞中RNF180表达缺失,其启动子区呈完全甲基化状态。应用去甲基化药物5-aza-dc处理后,CFPAC1、Panc5.04和PANC1细胞中表达无变化,T3M4和MIAPaCa2细胞中表达增加,SW1990、Panc10.05、PANC3.11和AsPC1细胞中恢复表达。结果表明RNF180的表达受启动子区甲基化调控。RNF180基因在原发性胰腺癌中的甲基化率是31.25%(35/112)。RNF180甲基化与肿瘤分期有相关性(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、吸烟、饮酒等因素均无相关性(P均>0.05)。结论 RNF180在胰腺癌中频繁发生甲基化,其表达受启动子区甲基化调节。RNF180甲基化是胰腺癌潜在的诊断和预后标志物。
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单位基础医学院; 郑州大学; 中国人民解放军总医院