斑马鱼髓系造血细胞缺陷突变体的大规模遗传筛选

作者：戴朝霞; 颜广; 陈英华; 刘伟; 霍中军; 温宗华; 刘靖; 王鹍; 黄志斌; 马宁; 陈小辉; 马品芸; 罗伟豪; 赵颖; 樊淑; 黄红辉; 温子龙; 张文清

来源：南方医科大学学报, 2010, 30(06): 1230-1233.

• 斑马鱼
• 髓系造血
• 正向遗传学筛选
• 苏丹黑
• 中性红

目的通过大规模化学遗传学方法筛选斑马鱼髓系造血缺陷突变体。方法利用化学诱变剂乙基亚硝基脲(ENU)将雄鱼精原母细胞诱变,通过与AB野生型雌性斑马鱼交配产生F1代,源自不同founder(F0)的F1代同胞之间交配产生F2家族,F3代来F2家族同胞内交配,并分别以中性红和苏丹黑B染色筛选巨噬细胞和粒细胞缺陷突变体。结果我们筛选了350个F2家族,共1424对鱼。初步筛选到6个斑马鱼髓系造血系统的突变体,其中3个突变体为中性红染色异常,另3个突变体为苏丹黑染色异常,表明以上突变体可能存在巨噬细胞或粒细胞的发育障碍。结论 ENU化学诱变和中性红及苏丹黑B染色筛选斑马鱼髓系造血缺陷突变体是简单、价廉、有效的化学遗传学方法。通过保留突变体对后代进行进一步的研究分析,有望鉴定和克隆影响斑马鱼髓系造血新的基因或已知基因的新的调控途径。

• 单位
  基础医学院; 南方医科大学