核心结合因子(Cbfa1/Runx2)重组腺病毒载体的构建、鉴定及在脂肪来源干细胞中的表达

作者：张辛; 杨民; 林霖; 陈苹; 马康涛; 敖英芳; 周春燕

来源：中国运动医学杂志, 2008, (01): 67-71.

DOI：10.16038/j.1000-6710.2008.01.031

• 核心结合因子
• 脂肪组织来源干细胞
• 腺病毒载体 core binding factor(Cbfa1)
• adipose-derived stem cells(ADSCs)
• adenovirus vector

目的:验证核心结合因子(Cbfa1/Runx2)的重组腺病毒载体可高效感染脂肪组织来源干细胞并表达蛋白。方法:分离、扩增脂肪组织来源干细胞并诱导其向骨细胞、脂肪细胞分化。将Cbfa1/Runx2cDNA的全长序列亚克隆到穿梭质粒pAdTrack上,在BJ5183细菌内和pAdEasy1同源重组,筛选阳性克隆,命名为Ad-Cb-fa1/Runx2。经酶切、PCR鉴定,线性化后以脂质体法转染293T细胞进行包装、扩增,利用报告基因GFP对病毒滴度和感染效率进行监测。通过RT-PCR、间接免疫荧光检测Ad-Cbfa1/Runx2感染脂肪组织来源干细胞后Cbfa1/Runx2基因的表达。结果:脂肪组织...

• 单位
  北京大学; 北京大学第三医院; 皖南医学院弋矶山医院