大黄素对体外培养NRK细胞水通道蛋白2表达的影响

作者：**; 李锋; 任秦有; 王文; 张鹏

来源：中国中西医结合杂志, 2010, (08): 871-874.

• 大黄素
• NRK细胞系
• 水通道蛋白2
• 蛋白激酶A

目的探讨大黄素对体外培养NRK细胞水通道蛋白2(AQP2)表达的调节效应及机制。方法体外培养NRK细胞,分为两步实验:第一步随机分为对照组和5、10、20mg/L大黄素处理组,采用间接免疫荧光法定性NRK细胞AQP2表达,Westen blot、半定量RT-PCR检测药物处理24h后AQP2蛋白及mRNA的表达;第二步随机分为对照组,20mg/L大黄素组,10mg/L8-Bromo-cAMP组、20mg/L大黄素加10mg/L8-Bromo-cAMP组,采用非放射性法检测药物处理24h后NRK细胞蛋白激酶A(PKA)活性水平。结果 AQP2表达于NRK细胞的细胞膜,进一步的Western blot及半定量RT-PCR结果显示,10、20mg/L大黄素培养液均可抑制NRK细胞的AQP2蛋白及mRNA的表达(P<0.05)。PKA活性结果显示,20mg/L大黄素能降低NRK细胞的PKA磷酸化水平(P<0.05)。结论大黄素可抑制NRK细胞AQP2基因转录与翻译,提示大黄的利尿作用可能与其调节AQP2表达有关,而且有可能是通过PKA通路调节AQP2的表达。

• 单位
  第四军医大学; 西京医院