摘要
目的探讨肝组织乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)总DNA(total DNA,tDNA)和共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的阴性参考值,为进一步研究实时定量PCR检测肝组织HBV tDNA和cccDNA的应用价值奠定基础。方法分别有88例HBsAg阳性/抗-HBc阳性、20例HBsAg阴性/抗-HBc阳性和19例HBsAg阴性/抗-HBc阴性慢性肝炎患者入选本研究。肝组织β-globin DNA、HBV tDNA和cccDNA采用实时荧光定量PCR检测,单个肝细胞HBV tDNA和cccDNA含量(copies/cell)=HBV tDNA实测值(copies)/β-globin DNA实测值(copies)和HBV cccDNA实测值(copies)/β-globin DNA实测值(copies)。肝组织HBVtDNA和cccDNA含量的计算单位定义为log10copies/106cell。统计分析采用SPSS 13.0软件。结果肝组织HBVtDNA和cccDNA鉴别HBsAg阳性/抗-HBc阳性与HBsAg阴性/抗-HBc阴性慢性肝炎的ROC曲线下面积分别为0.909和0.891(P=0.000和0.000),最佳截断值分别为5.772和4.883 log10 copies/106cells;鉴别HBsAg阳性/抗-HBc阳性与HBsAg阴性/抗-HBc阳性慢性肝炎的ROC曲线下面积分别为0.893和0.857(P=0.000和0.000.),最佳截断值分别为5.559和4.630 log10 copies/106cells。就HBsAg阳性/抗-HBc阳性慢性肝炎而言,当肝组织HBV tDNA和cccDNA≥5.699和cccDNA≥4.699 log10 copies/106cells时,肝组织HBV tDNA与cccDNA含量之间均呈显著正相关(P=0.000和0.000);当肝组织HBV tDNA<5.699和cccDNA<4.699 log10 copies/106cells时,肝组织HBV tDNA与cccDNA含量之间均无显著相关性(P=0.065和0.880)。结论肝组织HBV tDNA<5.699和cccDNA<4.699 log10 copies/106cells可能是合适的阴性参考值。
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单位上海市公共卫生临床中心