摘要
目的 探索环状核糖核酸锌指蛋白609(circZNF609)是否通过靶向微小核糖核酸-1287-5p(mi R-1287-5p)影响皮肤鳞状细胞癌(cSCC)A431细胞增殖和凋亡。方法 应用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定circZNF609和miR-1287-5p在cSCC组织中的表达。在cSCC A431细胞中转染小分子干扰阴性对照(si-NC组)、sicircZNF609(si-circZNF609组)、miR阳性对照(miR-NC组)、miR-1287-5p模拟物(miR-1287-5p组)、si-circZNF609+anti-miR-NC(si-circZNF609+anti-miR-NC组)、si-circZNF609+miR-1287-5p抑制剂(si-circZNF609+anti-miR-1287-5p组)。运用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、克隆形成实验、流式细胞术和蛋白质印迹法(Western blotting)测定细胞活力、克隆形成、凋亡和活化的胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、cleaved caspase-9蛋白表达。双荧光素酶报告实验分析circZNF609和miR-1287-5p的靶向关系。结果 circZNF609在cSCC组织中的表达水平比癌旁组织增加约2.85倍,miR-1287-5p在cSCC组织中的表达水平是癌旁组织的34%(P<0.05)。干扰circZNF609表达或miR-1287-5p过表达可降低cSCC A431细胞活力、克隆形成数,提高细胞凋亡率和cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达(P<0.05)。circZNF609靶向调控miR-1287-5p的表达。下调miR-1287-5p表达逆转了干扰circZNF609表达对cSCC A431细胞增殖和凋亡的作用。结论 干扰circZNF609表达通过靶向miR-1287-5p,抑制cSCC的细胞增殖,促进其凋亡。
-
单位西南医科大学; 洛阳职业技术学院; 成都市第二人民医院