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摘要
目的探究RNAⅢ抑制肽(RIP)在细菌的不同生长时相对葡萄球菌溶素和黏附相关蛋白表达水平的调节作用。方法按比例接种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌至培养基中,将过夜培养的细菌分别转接至TSB培养基(含0.5%的葡萄糖),将其浓度调整至1×108CFU/mL。RIP组加入课题组设计合成的RIP衍生物(RIP1183),对照组加入无菌磷酸盐缓冲液。检测其对细菌生长曲线和生物膜形成的影响,应用实时荧光定量聚合酶链式反应的方法,在细菌迟缓期(2 h)、对数期(6 h)和稳定期(10 h)检测RIP1183对RNAⅢ、人类白细胞抗原(HLA)、icaA和fnbA基因的转录水平的影响,并与对照组进行比较。结果与对照组比较,RIP1183不影响细菌生长,差异无统计学意义(P> 0.05)。与对照组比较,RIP组细菌生物膜形成显著减少(P <0.01)。迟缓期(2 h),与对照组比较,RIP组RNAⅢ表达明显降低(P <0.05)。对数期(6 h),与对照组比较,RIP组RNAⅢ、HLA表达显著降低(P <0.01);稳定期(10 h),与对照组比较,RIP组icaA、fnbA和RNAⅢ表达显著降低(P <0.05或P <0.01)。结论 RIP1183通过抑制附属基因调节系统的效应分子RNAⅢ的表达,显著降低不同时相不同毒力因子的表达,从而破坏细菌对环境适应机制,可能是其抗菌活性和抗生物膜形成的机制之一。
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