Nrf2蛋白在中波紫外线照射HaCaT细胞中的光保护作用

作者：林芳; 马良娟^*; 张晓卉; 柏冰雪

来源：中华皮肤科杂志, 2020, 53(02).

• NF-E2相关因子2
• 紫外线
• 活性氧
• 超氧化物歧化酶
• HaCaT细胞
• 氧化损伤

目的探讨Nrf2对中波紫外线(UVB)致HaCaT细胞光损伤的保护作用及其作用机制。方法将培养的HaCaT细胞分为对照组、UVB组、Nrf2组、Nrf2 + UVB组, Nrf2组、Nrf2 + UVB细胞感染Nrf2基因过表达慢病毒, UVB组、Nrf2 + UVB组细胞以30 mJ/cm2的UVB照射30 s, 继续培养24 h, 观察UVB照射后HaCaT细胞形态的变化, Western印迹检测各组Nrf2蛋白水平, CCK8法检测各组细胞生存率, 流式细胞仪检测各组细胞活性氧(ROS)水平, 生化法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平。多组间均数比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用LSD-t检验。结果对照组HaCaT细胞形态为多角形、呈簇集状生长, UVB照射后细胞出现皱缩、变圆, 漂浮细胞数增多, 贴壁数量明显减少。对照组、UVB组、Nrf2组、Nrf2 + UVB组Nrf2蛋白相对表达水平分别为1.84 ± 0.047、0.63 ± 0.082、2.19 ± 0.168、1.43 ± 0.069, 差异有统计学意义(F = 64.81, P < 0.05), Nrf2组水平高于对照组(t = 14.82, P < 0.05);4组细胞生存率分别为98.00% ± 2.39%、24.40% ± 2.98%、71.63% ± 3.39%、43.38% ± 3.39%, 差异有统计学意义(F = 236.66, P < 0.05), UVB组细胞活力低于对照组(t = 33.34, P < 0.05)和Nrf2 + UVB组(t = 10.07, P < 0.05);4组细胞的相对ROS含量分别为1.27 ± 0.10、5.65 ± 0.19、2.10 ± 0.73、3.67 ± 0.19, 差异有统计学意义(F = 481.39, P < 0.05), UVB组高于对照组(t = 33.68, P < 0.05)和Nrf2 + UVB组(t = 12.47, P < 0.05)。4组细胞SOD水平差异有统计学意义(F = 170.76, P < 0.05), UVB组低于对照组(t = 11.25, P < 0.05)和Nrf2 + UVB组(t = 17.52, P < 0.05)。4组细胞IL-6水平差异有统计学意义(F = 532.34, P < 0.05), UVB组高于对照组(t = 28.48, P < 0.05), Nrf2 + UVB组低于UVB组(t = 27.82, P < 0.05)。4组细胞TNF-α水平差异无统计学意义(F = 2.02, P = 0.19)。结论 Nrf2可以通过降低细胞内ROS水平, 提高内源性抗氧化酶SOD的活性, 保护细胞免受UVB照射引起的氧化损伤。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第二医院