蛋白质转导4型-铜锌超氧化物歧化酶融合蛋白对大鼠脑缺血/再灌注损伤保护作用的研究

作者：杨毅猛; 薛荣亮^*; 孟丽华; 党莎杰

来源：国际麻醉学与复苏杂志, 2019, 40(05): 426-431.

• 缺血再灌注损伤
• 自由基
• 蛋白质转导超氧化物歧化酶融合蛋白

目的探讨蛋白质转导4型-铜锌超氧化物歧化酶融合蛋白(protein transduction domain 4-Cu, Zn superoxide dismutase fusion protein, PTD4-Cu, Zn-SOD)对大鼠脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury, CI/RI)的保护作用。方法按完全随机法将120只SD大鼠分为4组(每组30只):假手术组(SH组)、缺血/再灌注组(I/R组)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)组、PTD4-Cu, Zn-SOD组(PTD4-SOD组)。I/R组、SOD组和PTD4-SOD组在烧灼凝断双侧椎动脉24 h后夹闭双侧颈总动脉, 6 min后重新开放, 制作CI/RI模型。SOD组与PTD4-SOD组于再灌注即刻分别经尾静脉注射SOD 6 mg/kg及PTD4-SOD 6 mg/kg, SH组及I/R组分别经尾静脉注射等容积PBS液。各组于再灌注2、6、12、24、72 h时各取6只断头取脑组织。H-E染色观察大鼠脑海马组织病理改变, 黄嘌呤氧化酶法检测大鼠脑海马组织SOD活性, 流式细胞仪检测海马细胞凋亡率。结果 H-E染色结果:SH组海马CA1区神经细胞排列整齐、紧密, 胞质淡红, 胞核蓝染, 核仁清晰;I/R组海马CA1区神经细胞排列紊乱, 异常细胞数量增多, 胞质、胞核固缩明显, 核仁消失, 核碎裂, 溶解;PTD4-SOD组与I/R组比较海马CA1区神经细胞排列较整齐, 异常细胞散在分布, 数量较少;SOD组改变介于PTD4-SOD组和I/R组之间。SOD活性检测结果:与SH组比较, I/R组、SOD组各时点, PTD4-SOD组再灌注12、24、72 h, 差异有统计学意义(P<0.05)。SOD组与I/R组各时点比较, 差异无统计学意义(P>0.05);PTD4-SOD组与I/R组及SOD组各时点比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。海马细胞凋亡率结果:与SH组比较, I/R组、SOD组、PTD4-SOD组各时点凋亡率明显升高, 差异有统计学意义(P<0.05);SOD组与I/R组各时点比较, 差异无统计学意义(P>0.05);PTD4-SOD组与I/R组及SOD组各时点比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PTD4-Cu, Zn-SOD对CI/RI具有保护作用, 其机制可能与其通过提高脑内SOD活性有效清除自由基有关。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院; 陕西省肿瘤医院