微孔板木瓜酶法筛查不规则抗体技术关键参数的确定

作者：董珀; 许飞; 曹锁春; 杨爱龙^*

来源：临床血液学杂志, 2021, 34(12): 874-877.

DOI：10.13201/j.issn.1004-2806.2021.12.011

• 微孔板
• 木瓜酶法
• 不规则抗体筛查

目的:研究影响微孔板酶法试验的关键参数,确定适合常州市中心血站微孔板酶法检测不规则抗体的最优条件。方法:混合6名献血者的O细胞,鉴定其抗原的多样性,判定其能否作为抗体筛选细胞。以试管木瓜酶法为基础,正交试验为原理,研究不同血浆和酶的量、不同酶的浓度对反应结果的影响,以此确立试验反应体系;并通过比对确定试验关键步骤的震荡参数。结果:6人份混合O细胞符合抗体筛选细胞的要求,选用筛选细胞与血浆、酶液的容量比例为1︰4,标化的酶溶液的浓度为1.25 g/100 mL PBS的反应体系,影响试验关键步骤的震荡最适频率为750 r/min、震荡最适时间为60 s; Lisswell软件读取中,凝集反应可靠扫描点范围是55%。结论:微孔板木瓜酶法筛查不规则抗体技术关键参数可以确定,为大规模筛查不规则抗体奠定了良好的基础。