IgA亲和体随机组合噬菌体文库的构建和体外分子进化

作者：温宗梅; 曹洁; 陈秋莉; 贾建安; 蒋少华; 潘卫

来源：第二军医大学学报, 2010, (01): 1-6.

• 肽库
• 免疫球蛋白A亲和体
• 串联重复序列
• 亲和力
• 分子进化 peptide library
• immunoglobulin A affibody
• tandem repeat sequences
• affinity
• molecular evolution

目的构建IgA亲和体随机组合文库并进行体外分子进化,研究IgA亲和体分子结构与功能的关系。方法基因合成两个IgA亲和体片段。3′端引入3个随机连接肽序列随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S,构建噬菌体展示随机组合分子文库。以人IgA为靶分子对该文库进行4轮亲和筛选。制备阳性筛选克隆的单克隆噬菌体,用ELISA鉴定IgA结合活性。结果成功构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合分子文库,库容量为3.4×107,滴度为1.6×1012TU/L,阳性克隆占79%以上,序列分析IgA亲和体随机连接,随机连接肽序列呈随机分布。在人IgA分子诱导的分子进化过程中,展示多个IgA亲和体串联体的噬菌体比...

• 单位
  同济大学附属上海市肺科医院; 中国人民解放军第二军医大学