HSPB1的R127W突变蛋白细胞内表达与神经丝轻链的共定位研究

作者：张如旭; 杨茜; 资晓宏; 李小波; 刘婷; 刘三妹; 李琳; 占雅静; 厉兰; 夏昆; 潘乾; 唐北沙

来源：中华医学遗传学杂志, 2011, 28(5): 496-500.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1003-9406.2011.05.005

• 腓骨肌萎缩症
• 热休克蛋白B1
• 神经丝轻链蛋白

目的 观察HSPB1的R127W突变蛋白在细胞内的分布,对神经丝轻链(neurofilament light chain,NFL)蛋白自身组装的影响和二者的共定位情况.方法 构建pEGFPN1-wt HSPB1和pEGFPN1-R127W HSPB1真核表达载体,瞬间转染Hela细胞后在激光共聚焦显微镜下观察EGFP-wt HSPB1 和EGFP-R127W HSPB1的胞内分布情况.pCL-NFL与pEGFPN1-wt HSPB1、pEGFPN1-R127W HSPB1共转染Hela细胞,通过间接免疫荧光技术在激光共聚焦显微镜下观察NFL胞内表达情况及R127W HSPB1与NFL是否存在共定位.结果 EGFP-R127W HSPB1在胞浆内形成以核周分布为主的聚集物,EGFP-wt HSPB1在胞浆和胞核中均匀分布；NFL与wt HSPB1共表达时在胞浆形成均一结构,与R127W HSPB共表达时形成胞内聚合物,聚合物中NFL与R127W HSPB1存在共定位.结论 HSPB1的R127W突变可能导致蛋白异常聚集、神经元细胞骨架不能维持稳定和正确组装.轴索细胞骨架的不稳定和物质转运障碍可能是R127W HSPB在腓骨肌萎缩症的主要致病机理.

• 单位
  神经内科; 中南大学; 中南大学湘雅三医院; 医学遗传学国家重点实验室