TRPC促进肾小球系膜细胞外基质沉积的机制研究

作者：魏琳婷; 葛蓬勃; 李柯; 李艳; 王引红; 赵纬昊; 崔晨凯; 董静; 高洁; 王莉; 付荣国^*

来源：西安交通大学学报（医学版）, 2023, 44(04): 518-524.

DOI：10.7652/jdyxb202304005

• 瞬时受体阳离子通道
• 血管紧张素Ⅱ
• 肾小球系膜细胞
• 细胞外基质沉积
• 肾脏纤维化

目的 探讨瞬时受体电位阳离子通道(transient receptor potential canonical, TRPC)促进大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)细胞外基质(extracellular matrix, ECM)沉积的作用机制。方法 免疫荧光染色方法观察TRPC1和TRPC6在HBZY-1细胞上的定位及表达；给予AngⅡ干预HBZY-1细胞后，应用qRT-PCR和Western blotting方法检测Gαq/PLCβ4/TRPC信号通路关键蛋白和ECM沉积指标[α-SMA、CollagenⅢ(ColⅢ)和Fibronectin(Fn)]的mRNA和蛋白表达；siRNA技术沉默TRPC1和TRPC6表达后，检测ECM沉积指标的表达；Fluo-4AM Ca2+成像技术测定细胞内Ca2+内流的变化情况。结果 TRPC1和TRPC6在HBZY-1细胞中均有表达，主要定位在细胞膜和胞质。AngⅡ刺激后，可以激活Gαq/PLCβ4/TRPC信号通路，表现为Gαq、PLCβ4、TRPC1和TRPC6的mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05)。细胞内的Ca2+内流增加(P<0.01),ECM沉积指标α-SMA、ColⅢ和Fn的mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)。RNA干扰技术沉默TRPC1和TRPC6表达后，导致胞内Ca2+内流减少(P<0.05),HBZY-1细胞ECM沉积指标的mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05)。结果表明，沉默TRPC表达可以抑制AngⅡ诱导的HBZY-1细胞ECM沉积，且可能与减少[Ca2+]i内流有关。结论 TRPC可能是肾脏纤维化新的治疗靶点。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院; 西安医学院第一附属医院