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摘要
目的:探讨石胆草总提物对阿尔茨海默症（AD）细胞模型的干预作用。方法:以6×10～4/ml SH-SY5Y细胞接种于96孔板,培养36h后,以20μmol/L的Aβ25-35诱导36h制备AD模型,采用边造模边给药分别给予终浓度75、100、150μg/ml的石胆草总提物培养36h,经甲醛固定,Trition透化,孵育一抗、二抗,经ODYSSEY CLx近红外双色荧光显色系统检测细胞内自噬相关蛋白LC3B、P62及凋亡相关蛋白Caspase-9;以12×104/ml SH-SY5Y细胞接种于6孔板,培养36h后,以20μmol/L的Aβ25-35诱导36h制备AD模型,收集细胞,装载Ca2+荧光探针、DCFH-DA探针通过流式细胞仪分别检测细胞中Ca2+及ROS水平。结果:与正常组相比,Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞模型中自噬相关蛋白LC3B、P62,凋亡相关蛋白Caspase-9及氧化应激中Ca2+和ROS水平显著性升高（P2+和ROS的水平,其中浓度为75μg/ml的石胆草总提物效果最佳。结论:石胆草总提物可能是通过降低自噬通量以及减弱氧化应激水平从而减少AD细胞模型中细胞凋亡水平发挥细胞保护作用,提示石胆草总提物可能对阿尔茨海默症有一定的改善作用。
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