激活的蛋白激酶C受体1在膀胱癌组织中表达及对膀胱癌阿霉素耐药的影响及其机制

作者：杨阳; 张刘辉; 樊鑫; 杨小明; 裴圆芳; 魏晓松

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(06).

• 蛋白激酶C受体1
• 膀胱癌
• 阿霉素
• 耐药
• 凋亡

目的探讨激活的蛋白激酶C受体1(RACK1)在膀胱癌组织中表达及对膀胱癌阿霉素耐药的影响及机制。方法选取郑州大学第一附属医院2020年1月至2022年1月收治的37例阿霉素耐药和41例非耐药的膀胱癌组织作为研究对象, 采用免疫组织化学分析耐药和非耐药膀胱癌组织RACK1蛋白表达水平。人膀胱移行细胞癌细胞系HT-1197采用梯度递增法建立阿霉素耐药细胞株HT-1197/ADM。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析HT-1197/ADM和HT-1197细胞株RACK1蛋白表达水平。采用对照慢病毒和RACK1短发卡RNA(shRNA)慢病毒感染析HT-1197/ADM, 建立析HT-1197/ADM组和析HT-1197/ADM/RACK1 KD组, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、EdU染色和体外移植瘤分析两组细胞增殖的能力。采用流式细胞仪分析两组细胞凋亡的影响;Western blot分析两组细胞凋亡相关蛋白表达水平。计量资料比较采用t检验。结果耐药膀胱癌组织RACK1蛋白表达水平(9.29±1.40)明显高于非耐药膀胱癌组织(6.20±0.95), 差异有统计学意义(t=11.520, P<0.05)。耐药膀胱癌细胞RACK1蛋白表达水平(1.71±0.19)明显高于正常膀胱癌细胞(1.22±0.11), 差异有统计学意义(t=5.483, P<0.05)。HT-1197/ADM组细胞吸光度(A)值(1.78±0.13)明显高于HT-1197/ADM/RACK1 KD组(1.31±0.03), 差异有统计学意义(t=8.340, P<0.05)。HT-1197/ADM组细胞A值(74.87±6.00)明显高于HT-1197/ADM/RACK1 KD组(54.18±7.88), 差异有统计学意义(t=5.115, P<0.05)。HT-1197/ADM组细胞成瘤体积[(608.33±65.13) mm3]明显高于HT-1197/ADM/RACK1 KD组[(487.67±54.09) mm3], 差异有统计学意义(t=3.491, P<0.05)。HT-1197/ADM组细胞成瘤质量[(4.88±0.64) g]明显高于HT-1197/ADM/RACK1 KD组[(3.46±0.57) g], 差异有统计学意义(t=4.045, P<0.05)。HT-1197/ADM组细胞凋亡比例[(15.53±1.78)%]明显低于HT-1197/ADM/RACK1 KD组[(25.94±3.33) g], 差异有统计学意义(t=6.746, P<0.05)。HT-1197/ADM组细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)蛋白表达水平(0.64±0.08、0.97±0.06)明显低于HT-1197/ADM/RACK1 KD组(0.81±0.03、1.33±0.11), 差异有统计学意义(t=8.024、6.935, P<0.05)。结论 RACK1在耐药膀胱癌组织中高表达, 敲降RACK1显著降低膀胱癌细胞阿霉素的耐药性, 增加化疗敏感性。

• 单位
  郑州大学第一附属医院