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摘要
目的 探究二参真武汤抑制心肌细胞纤维化的作用机制。方法 采用灌胃给予SPF大鼠二参真武汤、贝那普利7 d的方法制备含药血清，从出生3 d内的乳鼠心脏中提取原代心肌成纤维细胞，采用免疫荧光和台盼蓝染色法鉴定细胞纯度与成活率，采用CCK-8法确定二参真武汤含药血清的最佳给药浓度与给药时间，采用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激原代心肌成纤维细胞复制心肌纤维化模型，将原代心肌成纤维细胞分为正常组、模型组、二参真武汤组、贝那普利组，采用ELISA法检测胶原蛋白(collagenase, Col)-Ⅰ和Col-Ⅲ含量，采用Western blot法检测平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达水平，qRT-PCR法检测α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、PI3K、AKT、mTOR mRNA表达水平。结果 提取的原代心肌成纤维细胞纯度与成活率均达到95%以上。与正常组比较，模型组、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ含量显著升高(P<0.05),α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较，二参真武汤组原代心肌成纤维细胞中α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论 二参真武汤抑制心肌纤维化的机制与调节PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。
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