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摘要
目的研究新型非病毒载体磷酸钙纳米颗粒的生物学特性,评估其在肿瘤基因治疗中应用的前景。方法化学方法制备,氯化钙修饰纳米颗粒,用琼脂糖凝胶电泳分析磷酸钙纳米颗粒与DNA的结合效率及对DNA的保护作用,用绿色荧光蛋白基因作报告基因,将磷酸钙纳米颗粒为基因载体转染鼻咽癌(CNE-2)细胞和在动物体内转染肿瘤细胞;以及将磷酸钙纳米与自杀基因yCDglyTK结合,并在体外对鼻咽癌进行基因治疗。结果电镜观察证实磷酸钙纳米颗粒进入细胞内,磷酸钙纳米颗粒与DNA结合后,能对DNA起保护作用;磷酸钙纳米颗粒作为基因转染的载体,将绿色荧光蛋白基因导入CNE-2细胞,用荧光显微镜观察到高水平的绿色荧光蛋白表达;体内转染结果显示,纳米介导的基因在肿瘤组织中有很好的表达;以磷酸钙纳米为载体介导自杀基因yCDglyTK在体外治疗鼻咽癌的实验中显示,在加入5-FC后大量的CNE-2细胞出现死亡。结论磷酸钙纳米颗粒具有优良的生物学特性,是有应用前景的基因转染和基因治疗载体之一。
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