富血小板血浆通过Nrf2信号通路对脊髓损伤小鼠的抗炎抗氧化作用及其机制

作者:寇红伟; 闫立言; 韩萧男; 张明康; 郑赛磊; 陈松峰; 尚国伟; 姬彦辉; 冷子宽; 程田*; 刘宏建*
来源:中华实验外科杂志, 2022, 39(11).

摘要

目的探讨富血小板血浆通过Nrf2信号通路对脊髓损伤小鼠的抗炎抗氧化作用及其作用机制。方法采用改良Allen’s击打法制备小鼠脊髓损伤模型, 采用随机数字表法将小鼠分为对照组(SHAM组)、脊髓损伤组(SCI组)、富血小板血浆处理组(PRP组)。术后7 d, 小鼠麻醉处死, 酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-1β、IL-10的表达, 氧化应激试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量, 蛋白质印迹法(Western blot)检测Nrf2蛋白和Keap1蛋白的表达, 尼氏染色观察损伤组织中尼氏体的数量, 并使用小鼠BMS评分于损伤后1、3、7、14、21、28 d评估运动功能。组间比较采用t检验和单因素方差分析。结果 (1)PRP组尼氏体数量[(28.50±5.68)个]明显高于SCI组[(12.83±5.04)个], 差异有统计学意义(t=5.053, P<0.05)。(2)PRP组SOD[(131.07±15.45) U/g]和GSH[(5.60±0.98) μg/g]含量高于SCI组[(102.51±24.00) U/g、(2.28±0.58) μg/g], 差异有统计学意义(t=-2.451、-7.126, P<0.05)。MDA[(39.17±13.53) nmol/g]含量低于SCI组[(76.14±12.68) nmol/g], 差异有统计学意义(t=4.882, P<0.05)。(3)PRP组促炎因子IL-1β表达量[(85.06±15.45) pg/ml]低于SCI组[(121.28±19.98) pg/ml], 而抑炎因子IL-10表达量[(607.14±41.59) pg/ml]高于SCI组[(480.48±42.06) pg/ml], 差异有统计学意义(t=3.513、-5.245, P<0.05)。(4)相较于SCI组(0.79±0.15、1.69±0.19), PRP组的Nrf2蛋白表达量增加(1.11±0.23), Keap1蛋白表达量降低(1.27±0.15), 差异有统计学意义(t=-2.846、4.350, P<0.05)。(5)脊髓损伤后第14、21、28天, PRP组BMS评分[(2.50±0.55)、(3.17±0.75)、(3.83±0.75)分]高于SCI组[(1.50±0.84)、(2.17±0.75)、(2.50±0.55)分], 差异有统计学意义(t=-2.449、-2.301、-3.508, P<0.05)。结论富血小板血浆通过Nrf2信号通路对脊髓损伤小鼠发挥抗炎抗氧化作用。