转录因子SREBP1c在高脂诱导L6细胞胰岛素抵抗中的作用及机制

作者：吴文君; 毕艳; 汤孙寅炎; 尹雯雯; 陈莹莹; 朱大龙

来源：中华医学杂志, 2015, 95(08): 611-615.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2015.08.012

• 固醇调节元件结合蛋白-1c
• 棕榈酸
• 骨骼肌
• 胰岛素抵抗
• 胰岛素受体底物-1

目的探讨固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)对骨骼肌细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)的调控机制,以明确SREBP-1c在高脂诱导骨骼肌胰岛素抵抗中的作用。方法 L6细胞经2%胎牛血清(FBS)诱导分化成肌管细胞,经500μmol/L棕榈酸(PA)处理建立胰岛素抵抗模型。采用Western印迹检测L6肌管细胞经PA处理后0.5、1、3、6、12、24、48 h的SREBP-1c、p-IRS-1(Tyr608/612)、IRS-1、p-AKT(Ser473)、AKT的蛋白表达。检测L6肌管细胞过表达SREBP-1c或用肝X受体(LXR)激动剂T0901317(5μmol/L)处理后SREBP-1c、脂肪酸合成酶(FAS)及胰岛素信号通路相关分子的蛋白表达。采用双荧光素酶报告基因实验分析SREBP-1c转录因子对IRS-1启动子区域的调控作用。结果 L6肌管细胞经PA处理后,SREBP-1c蛋白表达在1 h后即显著增高,胰岛素信号通路蛋白p-IRS-1(Tyr608/612)、IRS-1及p-AKT(Ser473)表达在6 h后显著下降,AKT蛋白表达无变化。L6肌管细胞经LXR激动剂T0901317处理后SREBP-1c、FAS基因及蛋白表达增高,IRS-1基因表达下降,p-IRS-1(Tyr608/612)、IRS-1及p-AKT(Ser473)/AKT蛋白表达下降。L6肌管细胞过表达SREBP-1c后相关蛋白出现与LXR激动剂干预相似的变化。双荧光素酶报告基因实验结果显示SREBP-1c显著抑制IRS-1的启动子活性,SREBP-1c DNA结合域的酪氨酸突变成丙氨酸后则对IRS-1启动子无作用。结论 SREBP-1c通过抑制IRS-1基因转录表达而影响胰岛素信号通路,在高脂诱导骨骼肌胰岛素抵抗中起关键作用。

• 单位
  无锡市人民医院; 南京医科大学