Rab25在非小细胞肺癌厄洛替尼获得性耐药中的作用

作者:王旭东; 王江; 赵凤仪; 韩静; 孙建国; 陈正堂
来源:第三军医大学学报, 2016, 38(07): 681-686.
DOI:10.16016/j.1000-5404.201510148

摘要

目的探讨Rab25在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)厄洛替尼获得性耐药中的作用。方法传代培养PC9及其厄洛替尼耐药PC9/ER细胞,采用CCK-8法检测PC9/ER细胞的耐药指数。应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time,q PCR)及Western blot检测对比同等厄洛替尼浓度(0.1、0.2、0.3μmol/L)处理条件下,Rab25在两种细胞中的mRNA及蛋白表达差异,并以免疫荧光法定位Rab25在细胞中的分布。用小干扰RNA(siRab25)转染PC9/ER细胞,并以流式细胞仪及CCK-8法分别检测Rab25敲减后PC9/ER细胞的增殖指数(proliferation index,PI)及厄洛替尼IC50值的变化。结果 PC9/ER细胞的耐药指数是68.82±21.42。相同厄洛替尼浓度处理48 h后,PC9/ER细胞Rab25 mRNA及蛋白水平均高于PC9细胞(P<0.05),增高的Rab25蛋白主要表达于细胞膜。而且PC9/ER细胞Rab25蛋白水平随厄洛替尼处理浓度(0.1、0.2、0.3μmol/L)递增而增高。siRab25在PC9/ER细胞中成功转染后,转染组的厄洛替尼IC50值及PI均明显低于对照组(P<0.05)。结论Rab25在NSCLC厄洛替尼获得性耐药细胞中高表达,起着促进耐药的作用。

  • 单位
    第三军医大学新桥医院

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