外泌体介导LOXL4通过PI3K/AKT信号通路调控口腔鳞癌的免疫逃逸相关因子表达

作者：王梦漪^*; 朴维英; 苗伟

来源：免疫学杂志, 2021, 37(08): 679-685.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20210094

• 外泌体
• 赖氨酰氧化酶样蛋白4
• PI3K/AKT信号通路
• 口腔鳞癌
• 免疫逃逸相关因子

目的探讨外泌体(EXO)介导的赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4)对口腔鳞癌细胞(OSCC)免疫逃逸相关因子表达的影响和调控机制。方法 q RT-PCR检测口腔鳞癌细胞SCC9以及人口腔上皮细胞HOEC培养上清液中LOXL4的mRNA水平。差速离心法提取SCC9的外泌体,进行表征分析。Western blot检测外泌体标志物CD63、CD9以及目标基因LOXL4的表达量。使用荧光蛋白标记外泌体、SCC9细胞以及细胞核,利用共聚焦显微镜观察SCC9细胞对LOXL4-EXO的摄取。SCC9细胞和CD8+T细胞共培养,共培养体系分为空白对照组、LOXL4-EXO处理组、LOXL4-EXO联合PI3K/AKT的阻断剂Wortmannin处理组(LOXL4-EXO+WOR组)。CCK-8法检测细胞增殖率,ELISA法检测细胞培养液中IL-2、INF-γ、TNF-α的水平,Western blot检测PI3K、Akt、p-Akt、PD-L1的表达变化。结果与HOEC相比,LOXL4的m RNA水平在SCC9培养上清液中上调(P<0.05),并且成功分离和鉴定LOXL4-EXO,而且SCC9可摄取LOXL4-EXO。与空白对照组相比、LOXL4-EXO组的细胞增殖率上调(P<0.05),IL-2、INF-γ、TNF-α的水平下调(P<0.05),PI3K、Akt、p-Akt、PD-L1的表达量上调(P<0.05)。与LOXL4-EXO组相比,LOXL4-EXO+WOR组的细胞增殖率下调(P<0.05),IL-2、INF-γ、TNF-α的水平上调(P<0.05),PI3K、Akt、p-Akt、PD-L1的表达量下调(P<0.05)。结论外泌体介导LOXL4通过PI3K/AKT信号通路调节口腔鳞癌的免疫逃逸相关因子IL-2、INF-γ、TNF-α、PD-L1的表达。

• 单位
  内蒙古自治区人民医院